Tip 1 Diyabet (T1D), bağışıklık sisteminin seçici olarak üretilen pankreatif bir beta hücreleri, sadece immün rekreasyon veya enkapsülasyona dayanan, araştırmacılar artık doğrudan beta hücrelerinizi tedavi etmek için mükemmel bir şekilde mitolojiye ayırabiliyorlar.

Tip 1 Diyabette Immunological Challenge

T1D'de, otoreaktif T hücreleri beta-cellesel antijenleri tanır[Döneticileri) Bu tanıma, doğrudan beta hücreleri ve CD4[DDD:2|Dönetici üretimine karşı, otoimmücreksiyon işlemine yardımcı olur.[Döneticileri) Ayrıca, her iki CD8[DD) ek olarak, beta hücrelerine katkıda bulunan ve doğrudan beta hücreleri otomatik olarak indiren bir saldırıyı tetikler.

Temel bir zorluk, beta hücrelerinin sadece pasif hedefler olmadığıdır; kök hücrelerden elde edilmiş olsalar bile, immünolojik profili temel olarak değiştirilemeyecek kadar düşmanca bir ortamda karşı karşıya kalacaklardır.Bu, CRISPR-Cas9'un eşsiz moleküllerin ifadesini sağladığıdır.

CRISPR-Cas9, Hassas Bir Gen-Editing Tool olarak

CRISPR-Cas9 (genellikle düzenli olarak bir şekilde, belirli bir genomik tekrarlama yöntemine yol açan bir genom-editing teknolojisidir 9) bir bakteriye uyarak bağışıklık sistemi ile karşılaştırılabilir bir bağışıklık sistemi ile ilgili bir kılavuz RNA (gRNA) kullanır - daha sonra genetik bir dizinleri bozmak için istismar edilebilir. Hücrenin doğal onarım yolu - modern olmayan bir biyolojik temelleme yönteminin hassas ve esnekliğini ortaya koyar.

Önemli olarak, CRISPR-Cas9 insan pluripotent kök hücrelere (hPSCs) veya doğrudan peaveric islet hücrelerine, genetik olarak bağışıklık saldırısına karşı uyarlanmış beta hücrelerin nesline uygulanabilir. [03.2012] Teknoloji, temel düzenleme ve asal düzenleme ile çift iplik açmadan bile iyi kontrol sağlar.

Mühendislik Beta Hücresi için Stratejiler

Araştırmacılar beta hücreleri otomatik saldırıya karşı dirençli hale getirmek için birkaç farklı strateji tasarladılar, tüm Yararlı CRISPR-Cas9 beta hücre ve ev sahibi bağışıklık sistemi arasındaki immünolojik arayüzü yeniden yazabilmek için.

MHC Sınıf I ve Sınıf II'yi Değiştirin

En doğrudan yaklaşım, antijenleri T hücrelerine sunmaktır. Beta hücreleri, MHC sınıfı ile tanınan MHC sınıfı (FLT:0) |Döntgenik T hücreleri., beta-2 mikroglobulin (B2M) genini ifade eder ve bu tür hassas hücrelerin kendisini test etmesini engelleyerek, normal hücreyi tamamen kaybetmelerini sağlar.

MHC sınıfı II normalde beta hücreler üzerinde ifade edilmez, ancak enflamatuar koşullar altında ortaya çıkabilir. Bazı stratejiler CIITA master düzenleyicisini düzenlemeyi amaçlamak için tasarlanmıştır, ancak bu daha az yaygındır, çünkü sınıf II ekspres T1D'de birincil otoimmun öldürülmesi değildir.

Immunomodulatory Proteinleri eksprese

Örneğin, bağışıklık sisteminden saklanmak yerine, beta hücreleri otoimmün yanıtını aktif olarak bastırmak için mühendisi olabilir. Örneğin, beta hücreler, klooksit 1 (PD-L1) veya immünositik asit 4 (CTLA-4) türevli protein 4 (CTLA-4) türevcut büyüme faktörüne bağlanmak için uygun bir inhibitörünü sağlayarak, bu tür bir alerjik aktiviteyi düzeltebilir.

Özellikle zarif bir uygulama, bir immünekonst faktörün serbest bırakılmasını sağlar: beta hücresi, bir otoimmün sinyalinin tanınması üzerine, immünekonomik faktörün serbest bırakılmasını tetikledi.Bu yaklaşım, immünekonomiktörlülüğün saldırı alanına sınırlıyor.

Hipoimmunojenik Beta Hücreleri: “Universal Donor” Yaklaşım

T1D'nin özel otoimmune ortamına karşı korumanın ötesinde, NKcell aktivasyonunu (örneğin HLA tipi olmayan herhangi bir alıcıya aşılanabilen transjeneratif ürünler) ve MHC sınıfı II (CIITA) tarafından yapılan bu tür hipodinamik genlerin bozulması ve şimdi Alfession’un test ettiği transjenleri ortaya çıkarmak için daha geniş bir eğilim var.

Preclinical Del And Procept Studies

Birçok bağımsız laboratuvar, akut hücreli hücrelerin (SC ⁇ hücreleri) bir araya geldiği ve insan otoimmü modelinde bir çalışma yayınladı. Benzer şekilde Harvard Stem Hücresi[FLT], SC ⁇ hücreleri birleştirilmiş B2M-edited kök hücre (SC ⁇ hücreleri) ile 100 gün boyunca insan otoimmü T hücreleri insan bağışıklık sistemindeki bir grup insan bağışıklık sistemiyle hayatta kaldı.

Bu çalışmalar, genetik değişikliklerin hücreyi tamamen yeniden yapılandıramadığını gösteren, ev sahibi pankreasyona ait olan mutasyonları ortaya koydu.Bu çalışmalar, genetik modifikasyonların hücrelerin karmaşıklığını ve entegre edilmiş pankreasyonları ortaya koyduğunu gösteriyor, fonksiyonel izotorik gibi kümeler yaratıyor.

Bu deneylerde, hipoimmunojenik SC ⁇ hücreleri normal kan şekeri seviyelerini geri çevirebilir ve devam eden bir otoimmünyetik (NOD) farelerde daha fazla ayrıntı bulunabileceği bir model bulundu.Bu deneylerde, hipoimmunojenik SC ⁇ hücreleri normalleştirilmiş kan şekeri seviyeleri ve hatta devam eden bir otoimmün yanıt açısından reddedildi.

Güvenlikle ilgili ve Off-Target Etkileri

CRISPR-Cas9’un vaadine rağmen, nakil edilebilir beta hücreleri oluşturmak için kullanımı yasal güvenlik endişelerini arttırır.Et-ticareti hedefle ilgili olarak, tasarlanmış klonlamalara benzer şekilde genomik sitelerde istenmeyen kesintiler, klinik kullanımdan önce önemli olabilir ve düzenleyici kurumlar büyük ölçüde geniş bir önyükleme gerektirir.

Başka bir endişe, kromozomal arka düzenleme veya büyük boşlukların hedef sitesindeki artışların riskidir, çünkü Cas9, iki taraflı DNA hasarının bozulması, NHEJ tarafından onarım bazen beklenmedik yapısal varyantlar sunar. Multix düzenleme (örneğin, HLA-E) p53 işlevi ve geçici Cas9 kullanımı için bakımlı bir uyarıda bulunabilir.

Ayrıca, düzenlenmiş beta hücreleri kendilerini güvende olsa bile, yerel immünekonomik çevre yaratırlar (PD-L1 veya IL-10) diğer tümörlerin büyümesini teorik olarak izin verebilirler. Bu nedenle, uzun vadeli bir hayvan çalışmalarında değerlendirilmeli bir konudur.

Çeviri ve Klinik Uygulamaya Engeller

Güvenlik ve etkinlik önkoşul modellerinde kurulmuş olsa bile, birkaç engel CRISPR-edited beta hücreleri hastalara ulaşabiliyor. Sürekli yüksek kaliteli SC ⁇ hücreleri, genetik düzenleme ve klon seçimi ile aynı olmayan büyük bir zorluktır; teknik olarak sert ve pahalıya sahip olabilirler.

Transplantasyon sitesi de önemlidir. Alt kesim uzayı, omentum veya prevasküler bir cihaz araştırılıyor, ancak her biri kendi sınırlamaları nedeniyle önemli bir hücre kaybına yol açıyor.Sitenin seçimi de yerel bağışıklık ortamını dikkate almalıdır - örneğin karaciğer antijen temsil eden hücrelerde zengindir ve hala hipotanoza zarar verebilir.

Genetik olarak değiştirilmiş bir hücre ürünü için yapılan düzenleme uzun ve belirsiz bir süreçtir. ABD Gıda ve İlaç Yönetimi (FDA) henüz düzenlenmemiş hücrelerin kendi başına veya yeni antijenlere karşı yarattığı potansiyelleri onaylamadı.

Future Yol ve Etik Bakışlar

İleriye bakıldığında, alan, birden fazla düzenleme stratejisini tek bir “armored” beta hücresine entegre etmeye doğru ilerliyor. Araştırmacılar, MHC-I deletion'ı inflamasyona yanıt verme yollarını araştırıyorlar ve ilk düzenlemede CTLA-4-Ig, MHCI-Ig'yi tamamen devre dışı bırakmadan kesin bir şekilde mutasyonlar yaratabilirler.

Başka bir umut verici yön, klinik islet transplantasyonunda zaten kullanılır, ancak bağışıklık reddedilmesi için peavericler hücrelere uygulanabilir, potansiyel olarak daha küçük immünoterapistler dozlarına izin verebilir.

Etik olarak, otoimmüniteye dayanıklı beta hücrelerin yaratılması, insan hücrelerinin ve bu pahalı, kişiselleştirilmiş hücre tedavilerinin adil erişimin sürekli üreme hücrelerine uygulanmış olması için büyük destek ifade etmektedir.

Sonuç Sonuç Sonuç Sonuç Sonuç Sonuç Sonuç Sonuç

CRISPRCas9, Tip 1 diyabeti tedavi etmek için yeni bir olasılık dalgası açığa çıkardı, beta hücreleri otoimmün saldırılarına karşı dirençli hale getirdi. MHC moleküllerinin hedefli modifikasyonları ile immünmodülatory proteinleri ve yasal onaylar - bu yaklaşımdan önce üstesinden gelmek mümkün olduğunu göstermiştir: Düşmanca bir bağışıklık sisteminin varlığında hayatta kalan ve işlev gören hücreler umut vericidir, ancak önemli engeller - geçerlilik, ölçeklenebilir üretim ve onaylar dahil olmak üzere - sonuçta.