如何解释取出胶原酸脱碳碱酶(加德)自动抗体测试

光酸脱碳酶自动抗体测试的临床价值

细胞内酶催化了谷氨酸与γ-氨基丁酸的脱碳作用,后者是中枢神经系统的主要抑制神经递质,有两个不同的同位素:GAD65和GAD67。虽然神经组织中都表示异质,但GAD65在胰腺β细胞中占主导地位,在易受感染的个人中产生强烈的幽默免疫反应。当免疫系统错误地将这种自蛋白确定为外体并产生抗体时,这些GAD自体抗体就成为若干自体免疫状况的强效血清标记。

伽德自体抗体的临床意义远远超出了其实验室发现的作用。这些抗体经常在公开临床疾病爆发前数月到数年出现,成为宝贵的预测工具。测试将抗体浓度量化于外周血液中,结果通常以每毫升(U/mL)或乳头(titer)的国际单位报告。准确解释需要仔细关注诊断方法、实验室特定参考范围以及患者的整个临床背景。

GAD 自动抗体形成病理学

GAD自体抗体的开发代表了免疫耐受性的崩溃. 在基因上受感染的个体中,携带特定的HLA杂交型(特别是HLA-DR3,HLA-DQ2和HLA-DQ8),病毒感染或饮食因素等环境触发物可能会引发自体T细胞的分子模仿或旁观活化活化. 这些T细胞会为B细胞提供帮助,这些细胞会区分为针对GAD65的抗体保密等离子细胞.

GAD自体抗体的存在表明主动自体免疫,但并不直接造成组织损伤。相反,它们作为T细胞介质对GAD表达组织进行攻击的生物标志。这一区别在临床上很重要:抗体乳头通常与神经综合征中的疾病活动有关,但不一定直接在胰腺中破坏组织。

GAD 自动抗体测试指标

临床医生在怀疑涉及胰腺或中枢神经系统的自体免疫过程时,命令进行GAD自体抗体测试。

被怀疑为1型糖尿病:,特别是在儿童、青少年和成年人中出现高血糖、克特氏症、快减重或最近发作的多产和多产性疾病。
成人自体免疫糖尿病(LADA): 30岁以上的成年人,其苯基典型的类似2型糖尿病,但有证据表明自体免疫β-细胞被破坏.
斯蒂夫-人综合征(SPS):[] 以轴心肌的渐进刚性及刺激敏感肌痉挛为特征.
Cerebellar ataxia:子发作:行步不稳定,病变,和肢节不协调,没有其他解释.
] 通天癫痫:[] 新的-上位时间性叶癫痫或四肢脑炎,具有认知衰减.
尿出多内分泌综合征: 当多器官特异性自发性疾病在同一患者中并存时.
未解释的神经症状:包括刚性,痉挛,税法,认知衰减,或自失能.

分析方法和结果报告

使用经验证的免疫检测平台对血清样本进行GAD自抗体检测。

放射免疫化验(RIA)

历史金本位. RIA使用放射性标签重组的人类GAD65在患者血清中绑定自体,再用蛋白A降水. 这种方法提供高敏感性和特异性,但需要放射性同位素和专门的处理规程. 许多参考实验室由于监管负担而脱离了RIA.

酶-链接免疫活性酶(ELISA)

最广泛可用的格式. ELISA板被涂上重组的GAD65捕获病人自体抗体,然后用酶-结合抗人IgG和染色体底物来检测. 现代ELISA包显示出与RIA的极佳一致性并完全避免了放射性.

路西法尔塞免疫降水系统(LIPS)

使用重组GAD65的更新方法将聚变蛋白结合到发光酶中。当自体结合聚变蛋白时,它们会与蛋白A/G珠一起发芽,并测量出发光酶活性。 LIPS 提供了广泛的动态范围,并且没有辐射的吞吐量很高。

其结果最常用的用U/mL表示,每个实验室都确定自己的切入值. 一些实验室报告乳头(如1:10,1:100,1:1000),关键点是各平台的绝对值不同,纵向监测在整个过程中应该使用相同的方法.

参考范围和截止值

不存在性别与发展抗体阳性的普遍标准,每个实验室根据健康的捐赠者群体验证自己的参考间隔。

阴性: 5U/mL以下用于大多数商业化验;1.0U/mL以下用于神经指征中使用的超敏方法.
边界线或模棱两可: 5-20 U/mL在以糖尿病为重点的化验中;需要谨慎的解释并经常重复试验。
诱导: 20 U/mL以上用于糖尿病检测;1.0 U/mL以上用于某些敏感度较高的神经学化验.
高正:100U/mL以上;1000U/mL以上与神经自体免疫综合征有强烈联系.

神经病,特别是僵硬人综合症,通常会产生超过1000 U/mL的超高乳头,有时达到10万 U/mL。 1型糖尿病患者的浓度水平一般在20-200 U/mL范围内会略高。这种定量差异在差别诊断中有所助益。

解释临床背景下的GAD自动抗体结果

负结果

负面的GAD自体抗体测试表明,没有针对GAD65的可检测自体免疫反应,但这一结论必须在全临床中加以解释。

在疑似1型糖尿病中,负结果使得经典自体免疫T1D更不可能,但并不完全排除它。大约20-30%的新型自体T1D患者检测GAD抗体呈负性,这或者是因为他们的主要自体抗体特征包括IA-2、ZnT8,或者是因为胰岛素抗体,或者是因为他们的疾病是由其他免疫机制调解的。在疑似LADA的成年人中,GAD抗体的敏感性更高(70-90%),但有异位的LADA变体。

对于神经症状,负GAD抗体结果会降低GSD相关综合征如自体免疫性脑血管炎的可能性. 其他自体抗体,包括抗氨基苯丙胺,抗甘氨酸受体,抗GABA-A和GABA-B受体抗体,抗DPPX等,以及视临床表现而定的神经上抗体.

边线或低诱导结果

接近临界值的数值需要最仔细的解释。低水平的正态可能出现在几种情景中:

早期一型糖尿病在自体免疫刚刚出现前期.
弱或早期自体免疫神经病,抗体负担较轻.
甲状腺自发性疾病,其中高达10-20%的患者将GAD抗体作为更广泛的免疫障碍的一部分。
T1D患者的健康一等亲属,他们可能拥有低乳头而未进入临床疾病.
很少健康个体(约占一般人口的1%),没有临床意义.

当遇到分界线结果时,建议在3到6个月后进行重复检测。同时测量其他糖尿病相关自体抗体(IA-2,ZnT8,胰岛素自体抗体),并进行详细的临床评估,指导进一步决策。

高正结果

强烈的GAD自体抗体结果对自体免疫病理学具有高度的特异性。

发病者在发病前的十年中,在发病前,他一直坚持“发病后”的治疗方法。 调定性(20-200 U/mL): 与一型糖尿病或LADA基本一致。大约70-80%的新型T1D患者在此范围下坠。泰特尔在诊断后通常会逐年下降。
高正性(200-1 000 U/mL):糖尿病和神经综合症之间的重叠。
非常高的正性(>1,000 U/mL):强烈暗示神经自体免疫疾病,特别是僵硬人综合症。超过80%的SPS患者在这些水平上拥有GAD抗体。

高阳性支持对自体免疫状态的诊断,并经常指导免疫疗法的决定。在神经综合征中,抗体乳头可能与疾病活动相联,并可被连续监测以评估治疗反应。

影响GAD的自体水平的因素

疾病持续时间和阶段

在1型糖尿病中,GAD自体抗体在临床诊断时间前后达到高峰,并在随后几年出现下降。在5-10年的疾病后,很大一部分患者会变得具有分泌性。这种时间模式意味着长期存在的带有负GAD自体抗体的糖尿病不排除自体免疫病理。

在神经综合征中,GAD抗体乳头往往持续升高,通常持续了几十年。与糖尿病不同,糖尿病的目标组织被逐渐摧毁,GAD表达神经元的持续存在维持了免疫反应.

年龄和人口因素

近代T1D患者的乳腺比成年人的抗体乳腺通常更高。幼年期与主动性更强的自体免疫有关。性别差异存在,但临床上是微小的:患有自体免疫神经综合征的妇女的乳腺可能略高于男子。

多autimunity (多功能免疫)

多种自体抗体的存在 — — 包括甲状腺过氧代苯甲酸抗体、抗组织转录体、抗parietal细胞抗体和21-羟基lase抗体 — — 增加了自体免疫多分泌综合征的可能性。在这些患者中,GAD抗体可能是更广泛的免疫障碍的一部分,而不是疾病的主要驱动因素。

分析平台可变性

不同的实验室和方法产生不同的绝对值。在两个参考中心接受测试的病人可能会得到不完全的定量结果。序列测量应当始终使用相同的测定方法进行。如果测定结果在两次测量之间发生改变,则乳头变化20%的临床相关性值得怀疑。

阳性GAD抗体临床协会

第1型成人糖尿病和晚期自动免疫糖尿病

典型的T1D中,大约70%的高加索地区患者诊断为GAD抗体阳性,其他族群的抗体率较低。

一种阳性GAD抗体结果与低度或缺位C-peptide结合,证实了自体免疫糖尿病的诊断。这种区分具有治疗影响:患者需要胰岛素疗法,不应用硫磺素分泌管或其他可能加速β细胞衰竭的胰岛素分泌管进行治疗。在模棱两可的成人-肿瘤糖尿病中,GAD抗体检测有助于将LADA与2型糖尿病区分开来并指导适当的管理。

诊断后对GAD抗体的常规序列监测不推荐用于疾病管理,然而,抗体检测可以帮助对有非典型陈述或意外临床病变的患者进行诊断.

硬皮-人综合症

斯地夫-人综合征是一种罕见的神经系统障碍,其特点是心肌的进取性刚性,高性肌硬化,以及由自愿运动,情绪压力,或出乎意料的感官刺激所引发的痛苦肌肉痉挛. GAD65抗体是血清特征,在超过80%的经典SPS患者中被检测出. Titers通常都极高,通常超过1000 U/mL,有时会达到10万 U/mL.

SPS中的抗体乳头可能与单个患者的症状严重性有关。序列监测可以帮助评估静脉免疫球蛋白(IVIG)、rituximab(rituximab)或环磷酰胺等免疫疗法的反应。疑似SPS的患者如果对GAD抗体进行阴性检测,应当评估其他自体抗体,特别是抗安非他明,这说明其具有偏头痛性病原学,往往与乳腺癌有关。

GAD 抗体- 联合脑电图

脑细胞退化表现为腺动、性腺动、体外和肢体不协调,这些患者通常具有中高乳头并可能同时具有糖尿病或其他自体免疫特征。脑磁共振经常表现出脑萎缩。免疫疗法可以稳定或改善子群患者的症状,特别是在疾病治疗初期。

自动免疫癫痫和利姆比克脑炎

抗GAD抗体存在于新发性时间叶癫痫患者的子群中,特别是那些抗药性癫痫患者。当出现认知下降和精神症状时,演示会暗示四肢脑炎。脑磁共振可能在中性时间叶中表现出超强性。高质GAD抗体表明,免疫抑制可能有利于自体免疫性,包括皮质类固醇、IVIG或肌细胞细胞细胞细胞。

其他自动免疫协会

低到中度GAD抗体水平出现在一系列其他自体免疫条件下,常被作为偶然的发现:

甲状腺炎(桥本病、格雷斯病)
贫血症
维蒂利戈
肾上腺上腺素不足(病症)
自动免疫多分泌综合征第2类(施密特综合征)
早产卵子不足
自动免疫胃炎

在这些环境下,GAD抗体可能表明更广阔的自体免疫易感性,而不是直接的致病作用。附带GAD抗体的患者应当受到监测,以发现其病情发展到糖尿病或神经症状。

GAD抗体解释的局限性和缺陷

虚假的积极成果

大约1%至2%的健康人群中出现GAD自体抗体。假阳性反应也可能发生于:

其他自体免疫条件产生的交叉活性抗体
某些病毒感染,特别是可能引发瞬态自体抗体生产的肠道病毒
实验室技术文物,特别是旧的化验平台

单项阳性低质结果在作出临床决定前,应当经过重复检测确认.

虚假的负结果

假负数出现在几种情景中:

抗体水平下降的后期T1D
抗体反应针对GAD67,而不是GAD65, 检测到的检测很少
化验中使用的再混合抗原没有捕获到的乙酰戊酯特异性
减少抗体生产的免疫抑制疗法
很少的自体免疫疾病病例,由细胞免疫力调解,没有幽默反应

负GAD抗体结果不排除自体免疫疾病。在疑似带有负GAD抗体的T1D中,IA-2,ZnT8和胰岛素自体抗体的附加检测至关重要。在神经综合征中,应当追求一个全面的神经自体抗体面板。

轮胎和临床严重不协调

高乳腺素强烈地暗示了自体免疫病理,而绝对乳腺素并不总是与症状严重性有线性联系。某些患有卫生和植物检疫措施的患者的乳腺素极高,但症状相对温和,而其他乳腺素中等的患者则会出现衰弱性疾病。临床评估和功能状态仍然是治疗决定的主要指南,抗体乳腺素则充当辅助数据。

性别与发展的切实办法

当面临阳性或边缘性GAD抗体检测时,临床医生应当采取系统的方法:

验证结果: 对于边线或出乎意料的结果,在作出临床决定前,使用同一种测定方法进行重复测试.
彻底评估临床背景:[ 评估高血糖症(波罗玉里亚,多食,体重下降)的症状,神经学发现(刚性,痉挛,税状,发作),以及自体免疫病的家庭史.
命令支持诊断测试: 对于疑似糖尿病:禁用葡萄糖、HbA1c、C-peptide和额外的糖尿病自体抗体(IA-2,ZnT8,胰岛素),用于神经学演示:脑磁共振,癫痫协议,EEG,用CSF分析对GAD抗体和炎症标进行腰椎穿刺,以及神经自体抗体面板.
血清用于共生自体免疫:[ 甲状腺过氧代苯甲酸抗体,维生素B12级,晨光素,抗组织转录抗体,以及症状所显示的抗parital细胞抗体.
考虑专家咨询: 参考内分泌学用于糖尿病管理和神经综合征神经学,多学科护理优化了结果。

积极性别与发展的自动抗体的治疗影响

在适当的临床环境中,阳性GAD自体抗体证实自体免疫诊断并直接指导治疗决定.

在1型糖尿病和土地退化评估中,早期诊断能够迅速启动胰岛素疗法、全面糖尿病教育以及糖尿病克托酸症的预防。承认该疾病的自免疫性质可以避免不适当地使用硫柳阿斯或其他可能加速β-细胞衰减的口服剂。

在神经综合征中,正性GAD抗体支持使用免疫机能治疗. 一行方案包括: 抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体.

内出血免疫球蛋白(IVIG):[ SPS和GAD相关癫痫的示范疗效.
青小类:[]用于急性发作,但受长期副作用所限制.
Mycophenolate mifetil或azathiophrine: 为慢性免疫抑制而进行固醇分解的剂.
Rituximab: B细胞耗竭疗法专为可逆病例而设.

治疗期间监测抗体乳头可以提供免疫反应的客观数据,但临床改善仍然是主要的终点. 附带低阳性GAD抗体无症状的患者需要定期临床监测,但没有特定的免疫疗法.

研究前沿和未来方向

几个积极调查领域可能改善GAD抗体测试的临床用途. Multix抗体阵列现在允许从单一血清样本中同时检测出多个自体抗体,有可能提高T1D和神经综合征的诊断敏感性和特异性.

与糖尿病和神经病相关的GAD65特征图示研究旨在找出这些特征。如果成功,与当前定量方法相比,针对特征的特征图示分析可以更准确地区分这些特征。

正在进行的临床试验正在探索GAD- alum免疫疗法能否在新诊断出T1D患者中保持β-细胞功能. 这些抗原特异性免疫疗法方法利用GAD本身来诱发免疫耐受性,代表着从普遍免疫抑制到定向治疗的范式转变.

性别与发展抗体在其他情况下的作用 — — 包括使怀孕复杂化的一等糖尿病、自体免疫性胃炎和初等卵巢不足 — — 仍在调查之中。更大的未来研究,加上标准化的诊断,将澄清这些关联。

临床摘要和关键指导

GAD自体抗体是预测1型糖尿病,LADA,僵硬人综合征,脑血管病,自体免疫癫痫,自体免疫多分泌综合征的生物标志.
解释关键取决于乳头强度:非常高的乳头(>1,000 U/mL)强烈暗示神经自体免疫疾病,而中度乳头(20-200 U/mL)则更常见地与糖尿病相伴.
边界线结果需要确认、重复测试和评价其他自体抗体。
始终在全临床范围内解读GAD抗体结果,包括症状,其他实验室发现,成像或电生理学数据等.
负结果不排除自体免疫疾病;额外的抗体应当根据临床怀疑进行检测.
积极的结果具有直接的治疗影响:自体免疫糖尿病胰岛素疗法和神经综合症免疫疗法。
内分泌学家和神经学家之间的多学科协作优化了糖尿病和神经自体免疫重叠患者的管理.

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关于其他权威资料,请查阅PubMed,供同行评审的关于GAD自体抗体临床应用的研究、内分泌学会糖尿病自体检测临床实践指南、美国神经科学院自体免疫神经综合症评估指南。国家饮食补充卫生局提供了与自体免疫状况有关的维生素补充的背景,以及国家糖尿病和消化和肾病研究所提供了全面的病人教育材料。